产品货号:
MT2603
中文名称:
LAMP扩增试剂盒(SYBR荧光染料法)
英文名称:
Bst2.0 SYBR Green LAMP Kit
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒基于Bst2.0 DNA聚合酶,是以DNA模板LAMP等温扩增反应的绝佳试剂,此外,本试剂盒还可以用于其它恒温扩增实验,包括CPA、SMAP等。
本试剂盒提供的2×SYBR IsoAmp Buffer包含dNTPs、Mg2+、反应缓冲盐及SYBR Green染料,用于实时荧光检测。
组分 | 规格 |
Bst2.0 DNA Polymerase(3.2U/μL) | 250μL |
2×SYBR IsoAmp Buffer | 1mL |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。
- Bst2.0 DNA Polymerase中含22%海藻糖,不含甘油,因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品,以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。
- 对成功建立LAMP检测方法至关重要的四个参数分别是:引物位置、引物使用浓度、反应温度(60~65℃)和反应时间。引物使用浓度、反应温度是优先要确认的参数,如经过参数调整后仍不能达到检测用标准,则重新设计引物组合,再进行测试。
- 在用于其它恒温扩增反应时(如CPA、SMAP等),可参考如下LAMP扩增策略进行,反应时间可能会需要调整。
- 关于矿物油的使用,在配制完LAMP反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污染。
以LAMP恒温扩增为例:
- 按下表向0.2mL EP反应管中加入各成分配制反应体系
成分 用量 2×SYBR IsoAmp Buffer 10μL Bst2.0 DNA Polymerase 2.5μL 10×LAMP Primer Mix 2μL 模板DNA X μL ddH2O 至20μL - 10×LAMP Primer Mix浓度:FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4μM each、F3/B3 2μM each。
- 荧光定量PCR仪的设置
LAMP SYBR Green的检测可以使用标准定量PCR仪(也可使用恒温荧光设备)。
使用定量PCR仪进行LAMP SYBR Green扩增程序:
步骤1:60℃ 10s
步骤2:60℃ 50s收集信号,循环25次
总反应时间为25min。
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